Современные методы диагностики туберкулеза

Содержание

18) Современные методы обследования больного туберкулезом. Диагностический минимум обследования больного туберкулезом.(одм)

Современные методы диагностики туберкулеза

ОДМ (обязательныйдиагностический минимум при обследованиилиц с патологией органов дыхания):

1 .Целенаправленнособранный анамнез.

2. Стетоакустическоеисследование органов дыхания.

3.Рентгенологическое исследованиеорганов дыхания (крупнокадроваяфлюорография, обзорная рентгенографияорганов грудной клетки, компьютернаярентгенограмма).

4.Общий анализ крови.5.Общий анализ мочи.

6.Исследование мокроты(промывных вод бронхов) на МБТ (3-х кратнаябактериоскопия).

7.Проба Манту с 2ТЕППД- Л

19. Инструментальные методы обследования и их роль в диагностике и дифференциальной диагностике туберкулеза. Инструментальные методы диагностические оперативные вмешательства (инвазивные):

1. Диагностическаябронхоскопия.

2. Транс торакальнаяаспирационная биопсия легкого.

3. Пункция периферическоголимфатического узла.

4. Плевральнаяпункция.

5. Бронхография.

6. Плевроскопия.

7. торакоскопияс биопсией.

8. Биопсия прескаленойклетчатки.

9. Медиастинотомия.

10. Открытая биопсиялегкого.

20. Лабораторные методы выявления микобактерий туберкулеза Методы обследования на мбт

МЕТОДЫ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА Бактериологическаялаборатория играет существенную рольв выявлении, диагностике туберкулеза,выборе рациональных схем химиотерапиии оценке их эффективности.

Бактериологическаядиагностика включает обработкуклинического материала, микроскопическоеисследование, выделение микроорганизмас применением культуральных методов,идентификацию микобактерий с использованиембактериологических и биохимическихгестов, а также определение лекарственнойчувствительности микобактерий.

Существуетнесколько групп методов, используемыхдля выявления МБТ в различномдиагностическом материале: рутинные(микроскопия, культуральное исследование),биологические (биопроба, определениевирулентности штаммов МБТ).

автоматическиесистемы (MGIT,ВАСТЕС,МВ/ВасТ, ESPCultureSystemидр.), молекулярной енетические методики(PCR.I.CR,NASBA,Q-Belaидр.).

Каждый из этих методов обладаетопределенной чувствительностью испецифичностью, что необходимо учитыватьпри клинической интер­претацииполученных результатов.

Бактериоскопическоеисследование.

Бактериоскопическоеисследование мокроты с окраской мазкапо Цилю-Нильсену для выявлениякислото­устойчивых микобактерий(КУБ) является наиболее быстрым, доступными экономически эффективным из существующихметодов выявления больных туберкулезом.Оно может быть осуществлено в любойклинико- диагностической лаборатории(КДЛ) лечебно-профилактических учрежденийвсех уровней и ведомств.

Бактериоскопиямокроты представляется чрезвычайноинформативной для выясненияэпидемиологической опасности пациентадля окружающих, которая коррелирует счислом микобактерий в образце.Бактериоскопическое исследование,проведенное должным образом, имеетположительную прогностическую ценностьдля легочного туберкулеза, более 90%.Разрешающая способность данного методасоставляет 50-100 тыс.

микобактерий в 1миллилитре мокроты и существенно зависитот ряда факторов: правильности сборамокроты, подготовленности лабораторногоперсонала и разрешающей способностииспользуемых микроскопов. При микроскопиимазков, приготовленных из проб, взятыхв течение трех последовательных дней,результативность метода повышается на20-30%.

Однако нет необходимости использоватьболее 4-5 проб мокроты.

Метод окраски поЦилю-Нильсену наиболее часто используетсяпри бакгериоскопичсском выявлениимикобактерий.

Он заключается в следующем:мазки мокроты окрашивают фуксином принагревании, затем обесцвечиваютсолянокислым спиртом и докрашиваютметиленовым синим. В результатемикобактерий окрашиваются в малиновыйцвет, а фон — в синий.

Это специфическоеокрашивание обусловлено способностьюмикобактерий удерживать краситель приобработке кислотой или спиртом.

В бактериологическихлабораториях, выполняющих большоеколичество исследований (100 и болееежедневно), используется люминесцентнаямикроскопия. Данный метод основан наспособности липидов микобактрийвоспринимать люминесцентные красители(акридиновый оранжевый, аурамин, родамини др.) и затем светиться при облученииих ультрафиолетовыми лучами.

В зависимостиот красителей, микобактерий туберкулезадают четкое ярко-красное свечение назеленом фоне или золотисто-желтое – натемно-зеленом фоне.

Метод люминесцентноймикроскопии обладает большейчувствительностью, чем световаямикроскопия, особенно в сочетании сметодом обогащения диагностическогоматериала (микроскопия осадка), посколькулюминесцентная микроскопия позволяетобнаружить измененные микобактерий,утратившие кислотоуетойчивость. в связис чем они не выявляются при бактериоскопиипо Цилю-Нильсену.

Мазки для люминесцентноймикроскопии готовят из осадка, полученногопосле обработки диагностическогоматериапа детергентом с последующимотмыванием либо нейтрализацией. Приположительном результате бактериоскопиимазков, окрашенных флуорохромами, должнабыт ь проведена подтверждающая микроскопиямазков, окрашенных по Цилю-Нильсену

Бактериоскопическоеисследование необходимо проводитьочень тщательно. Обычно образец исследуютв течение 15 минут (что соответствуетпросмотру 300 полей зрения), чтобы сделатьзаключение об отсутствии или наличииКУБ в препарате. При окрашиваниифлюорохромами для исследования одногомазка требуется меньше времени.

Основным диагностическимматериалом для бактериоскопии на КУБслужит мокрота. Результатыбактериоскопического исследования наКУБ других биологических материалов(различных жидкостей, тканей, гноя, мочии т.д.) имеют ограниченное значение длядиагностики туберкулеза. Так. исследование9

т. а

мазков из осадкацентрифугированной мочи не всегдапозволяет получить достоверныерезультаты, поскольку в моче могутприсутствовать нетуберкулезныемикобактерий. Поэтому выявление КУБ вмоче не всегда свидетельствует о наличииспецифического процесса. В мазках изосадка промывных вод желудка и другихматериалов могут обнаруживатьсякислотоустойчивые са-профиты, которыелегко спутать с МВТ.

Результатмикроскопического исследования позволяетсделать заключение только о наличииили отсутствии в препарате кислотоустойчивыхбактерий.

Достоверно диагноз «туберкулез»можно установить только после выделенияиз клинического материала культуры МБТс помощью культурального метода и ееидентификации.

Отрицательный результатбактериоскоскопического исследованияне исключает диагноз «туберкулез», таккак в мокроте некоторых пациентов можетсодержаться меньше микобактерий, чемпозволяет выявить бактериоскопия.

Количество обнаруженныхКУБ определяет степень тяжести заболеванияи опасности больного для окружающих.Следовательно, исследование должнобыть не только качественным, но иколичественным.

В современныхэпидемиологических и экономическихусловиях бактериоскопическое исследованиемокроты у обратившихся в ЛПУ за врачебнойпомощью лиц с клиническими симптомами,подозрительными на туберкулез, являетсяприоритетным направлением в тактикераннего выявления данного заболевания.

Возрастание роли этого метода связанотакже с возникновением в последние годыостропрогрессирующих форм заболевания,сопровождающихся выраженными клиническимипроявлениями и обильным

Культуральное(бактериологическое) исследование.Начиная со времени проведения работКоха и до 1924 г. усилия ученых, направленныена поиски методов выделения чистыхкультур микобактерий туберкулеза, неимели особых успехов. В 1924 г.

Левенштейни Сумиоши установили, что кислоты ищелочи в известных концентрациях и приопределенных экспозициях убиваютсопутствующую микрофлору, не влияя нажизнеспособность МБТ. Этот метод принепрерывном совершенствовании сталприобретать практическое значение.

Внастоящее время бактериологическое(культуральное) исследование биологическогоматериала на МБТ благодаря его высокойчувствительности (от 10 до 100 жизнеспособныхмикробных клеток в 1 мл исследуемогоматериала) и специфичности в сочетаниис микроскопическим методом является«золотым стандартом» в диагностикетуберкулеза.

Бактериологическоеисследование на туберкулез выполняетсяв специализированных бактериологическихлабораториях противотуберкулезныхдиспансеров или посевных пунктах.

Материал длябактериологического исследованиясобирают асептически. Перед проведениембактериологического исследованияпоступившие в лабораторию пробыобрабатывают растворами кислот илищелочей с последующим центрифугированием.

Это необходимо дня разжижения иконцентрации образца, а также дляпредотвращения контаминации, посколькупробы мокроты вязкие по консистенциии содержат большое количество микрофлоры.

Около 1 мл разжиженного и деконтаминированногоклинического образца засевают в пробиркисо средой и инкубируют при 37°С в течение10 недель.

Длякультивирования микобактерий используютплотные (яичные, агаровые) и жидкиепитательные среды. Яичные среды содержа!цельные яйца или яичный желток, а такжефосфолипидьг, белки и другие ингредиенты.С целью предотвращения контаминации ксреде добавляют некоторые красители,например, малахитовый зеленый, а такжеантибиотики.

Поэтому яичные среды(Левеншейна-Йенсена, Финна), на которЕлхкультивируют микобактерий. имеютсине-зеленый цвет. Использование яичныхсред позволяет получить видимый ростколоний М tuberculosisчерез18-24 дня в виде сухого морщинистого налетакремового цвета.

Однако качествоингредиентов, из которых готовитсясреда, иногда значительно варьирует,что может влиять на воспроизводимостьрезультатов. По сравнению с яичнымиагаровые среды имеют ряд преимуществ:они готовятся из полусинтетическихоснов, что обеспечивает более стабильноекачество и воспроизводимость результатов.Детекция роста МБТ на агаровых средахвозможна через 10-14 дней.

Однако агаровыесреды дороже, требуют присутствия СОгв атмосфере и инкубируются в термостатене более 1 месяца.. Как правило длявыделения микобактерий используетсянабор из двух разных питательных сред.

Автоматическиесистемы. Разработка радиометрическойсистемы ВАСТЕС 460 (BectonDickinson)ознаменованасобой качественный прорыв в быстройдетекции микобактерий и определенииих лекарственной чувствительности

Автоматическиесистемы, предназначенные для выявлениямикобактерий туберкулеза, позволяютпроводить детекцию роста микобактерийв 2-3 раза быстрее, чем классическиеметоды.

Положительный результат анализадолжен обязательно подтверждатьсябактериоскопически.

В практикебактериологических лабораторийисследование с использованиемавтоматических систем обязательнопроводится параллельно с исследованиемна плотных питательных средах

Идентификациимикобактерий. Несмотря на то, чтоморфология колоний, наличие пигментаи ростовые характеристики дают некоторое

ю

*

Источник: https://StudFiles.net/preview/6010415/page:8/

Современные методы диагностики туберкулеза

Современные методы диагностики туберкулеза

Туберкулез — хроническое инфекционное заболевание, вызываемое микобактерией туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis). Микобактерия была открыта в 1882 году немецким бактериологом Р. Кохом, поэтому ее часто называют палочкой Коха.

Механизм заражения туберкулезом

Микобактерии туберкулеза широко распространены в окружающей среде. Носителями и источником инфекции являются больные люди и крупный рогатый скот. Заражение чаще происходит через дыхательные пути и реже — алиментарным путем.

После проникновения в организм человека микобактерии инфицируют макрофагов, образуя в дальнейшем микобактериальные фагосомы. Микобактерии противодействуют дальнейшему превращению фагосомы, нарушая процессы лизиса бактериальной клетки.

Такой механизм защиты позволяет микобактериям выживать в клетках хозяина. Находясь в макрофаге, микобактерии размножаются. После гибели макрофага, бактерии попадают во внеклеточную среду.

Дальнейшее существование бактерий зависит от иммунных свойств организма — активности макрофагов и Т-лимфоцитов.

Виды микобактерий и здоровье человека

К роду микобактерий относится несколько десятков видов. Основную угрозу для здоровья людей несут микобактерии человека (Mycobacterium tuberculosis) и микобактерии бычьего типа (Mycobacterium bovis). Кроме них, патогенными свойствами обладают микобактерии Mycobacterium africanum, М. microti, М. canetti, М. caprae, М. pinnipedii.

Эти виды проводят к развитию туберкулеза человека с его типичными клиническими и морфологическими признаками. Перечисленные микобактерии составляют, так называемый, комплекс туберкулезных микобактерий (МТВС). Выделяют также Мycobacterium avium complex (M.avium, М. avium paratuberculosis и др.).

В него входят бактерии, вызывающие диссеминированные процессы внелегочной локализации у человека.

К нетуберкулезным видам микобактерий, приводящих к развитию микобактериозов, относятся такие виды, как Mycobacterium chelonae, M. kansassi, M. xenopi и другие. Эти микобактерии вызывают заболевания легких, похожие на туберкулезный процесс, однако они более эффективно поддаются лечению противотуберкулезными средствами.

Один из видов микобактерий вызывает другое серьезное заболевание — лепру. Возбудителем в этом случае является Mycobacterium leprae.

Устойчивость микобактерий

Микобактерии чрезвычайно устойчивы во внешней среде. В высохшей мокроте и в пыли они могут находиться до 1 года, в почве до полугода. Их высокая устойчивость создает значительные трудности в борьбе с этой инфекцией.

Важной особенностью микобактерий является их свойство долгое время находиться в организме человека в латентном состоянии.

При определенных ситуациях латентная фаза, протекающая без клинических проявлений, может перейти в активную форму.

Скрытое протекание инфекции и стертость клинических проявлений существенно затрудняют раннюю выявляемость заболевания. Именно поэтому диагностика латентного туберкулеза является крайне важной.

Лабораторные тесты для выявления микобактерий

Разработано большое количество лабораторных тестов для идентификации микобактерий туберкулеза в различных биологических жидкостях и тканях. Основными являются микроскопия биологических жидкостей с окраской мазков по Цилю-Нильсену, бактериологический посев, серологические методы исследования, применение метода полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Микроскопический метод

Микроскопический способ выявления микобактерий основан на их способности окрашиваться в красный цвет при использовании специальных красителей, тогда как другая микрофлора приобретает при этом синий цвет.

Недостатком метода является его низкая чувствительность, поскольку для выявления микобактерий требуется их достаточное содержание в исследуемом образце.

Повышение чувствительности микроскопического метода можно увеличить, применяя люминисцентную микроскопию.

Серологические методы диагностики

Высокочувствительными методами диагностики туберкулеза являются серологические методы диагностики.

После встречи человека с бациллой туберкулеза, как и с любым другим чужеродными агентом (вирусы, бактерии, глистная инвазия), иммунная система человека начинает вырабатывать специфические белки — антитела, блокирующие жизнедеятельность бактерий. Так осуществляется один из видов защиты организма человека от многочисленных болезнетворных микробов и вирусов.

После внедрения бактерий туберкулеза клетки иммунной системы начинают вырабатывать специфические антитела различных классов — IgM, IgA, IgG, которые циркулируют в кровеносном русле. На обнаружении таких специфических антител построена серологическая диагностика туберкулеза.

К основным современным методам серологической диагностики относятся тест-системы, основанные на технологиях, использующихся в иммунохимии — ИФА (иммуноферментное исследование), РИА (радиоиммунный анализ), иммунохроматографические методы (Hexagon TB, TB Check-1), иммуноблот. Повышение чувствительности методов ИФА постепенно приводят к вытеснению дорогостоящих радиоиммунных методов в диагностике туберкулеза.

Первыми антителами, появляющимися в крови, являются антитела класса IgM. Как правило, они выявляются в сыворотке крови через 2-3 недели после встречи с инфекцией и могут обнаруживаться на протяжении двух лет. Большинство тестов на основе ИФА технологий разработано для выявления антител класса IgG и суммарных антител (IgG + IgA + IgM).

Метод иммуноблота относится к подтверждающим методам диагностики наличия инфекционного процесса, поскольку позволяет выявлять одновременно несколько видов антител различных классов иммуноглобулинов к различным белкам бактерий.

Разновидностью иммуноблота можно считать метод TB-Spot, где в качестве антигенов используются два вещества, довольно специфичных именно для микобактерий (липоарабиноманнан и белок весом 38 кДа).

При наличии антител к микобактериям туберкулеза в сыворотке крови происходит их связывание с данными белками, сопровождающееся характерной окраской.

Микобактерия туберкулеза имеет в своем составе различные вещества (антигены), на которые организм человека вырабатывает антитела. Чем специфичнее/уникальнее бактериальный антиген, тем специфичнее будут образоваться на этот антиген антитела.

Проблема повышения специфичности состоит в обнаружении таких антигенов и создании высокоспецифичных ИФА тест-систем для диагностики туберкулеза. Одним из таких белков, применяющихся в одностадийной тест-системе, является белок А60, специфичный для микобактерии. Этот белок после специальной очистки фиксируется на мембране.

После добавления сыворотки больного человека и наличия в ней антител происходит их связывание с белком. Место связывание окрашивается в красно-фиолетовый цвет.

Применение иммуноферментных методов исследования является важным приемом в диагностике латентного туберкулеза. Выявление антител при помощи иммуноферментных технологий возможно не только в сыворотке крови, но и в моче, плевральной жидкости, мокроте, спинномозговой жидкости.

Бактериологический метод

Бактериологический метод (посев материала на специальные среды) обнаружения микобактерий туберкулеза является высокоспецифичным методом, но имеет существенный недостаток: для идентификации бактерии при посеве на классические среды требуется около 4-8 недель.

Этот способ выделения микобактерий обладает большей чувствительностью по сравнению с микроскопическим методом и позволяет после обнаружения микобактерий провести исследование по определению чувствительности к противотуберкулезным препаратам.

Применение новых питательных сред и специализированного бактериологического оборудования позволяет определить рост микобактерий уже через 2 недели.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

После расшифровки ДНК микобактерий туберкулеза и введения в лабораторную практику метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), данный способ стал широко применяться в диагностике этого заболевания.

Метод высокоспецифичен и позволяет проводить исследования небольшого количества материала.

По оценкам ряда исследователей, метод ПЦР по чувствительности и специфичности превосходит культуральный метод диагностики при внелегочных формах туберкулеза.

Цитологические и гистологические методы

Цитологические и гистологические методы диагностики туберкулеза позволяют выявить характерные морфологические признаки наличия заболевания. Обнаружение клеток Лангханса может свидетельствовать о наличии туберкулеза. Следует учитывать, что эти клетки могут появляться и при других инфекционных заболеваниях — саркоидозе, сифилисе, бруцеллезе.

Реакция Манту

Одним из самых ранних методов диагностики туберкулеза является реакция Манту (с 1908 года). Суть этой реакции заключается во введении внутрикожно туберкулина, представляющего собой очищенную смесь убитых культур микобактерий человека и бычьего вида. Результат пробы оценивают по величине инфильтрата через трое суток.

Диаскинтест и квантифероновый тест

Современное развитие иммунологии и иммунохимии привело к внедрению новых тестов в диагностике туберкулеза — «диаскинтест» и «квантифероновый тест».

Проведение диаскинтеста заключается во внутрикожном введении двух белков, присутствующих у микобактерий опасных для человека, с последующей оценкой реакции в месте введения.

Квантифероновый тест проводится в пробирке крови взятой у пациента. Тест основан на способности белков, выделенных из микобактерий туберкулеза, стимулировать выработку гамма-интерферона сенсибилизированными Т-лимфоцитами человека, то есть инфицированного пациента.

Накопленный опыт в лечении туберкулеза свидетельствует о трудностях диагностики этого заболевания.

Применение одного метода часто бывает недостаточно, поэтому существует необходимость использования различных приемов из арсенала инструментальных и лабораторных способов.

Следует учитывать, что каждый из методов имеет свои недостатки, а их сочетание может привести к более достоверному заключению. 

Источник: https://formulazdorovya.com/1009954970882279452/sovremennye-metody-diagnostiki-tuberkuleza/

Пцр диагностика туберкулеза у детей и взрослых

Современные методы диагностики туберкулеза

Современные методы диагностики (пцр, диаскинтест, квантифероновый тест) обладают высокой эффективностью, но на практике исследования не проверены. Туберкулинодиагностика была основой для выявления инфицированных и больных людей.

Способ позволил выявить много больных людей, снизить статистику заболеваемости, смертности.

Посев на микобактерии и микроскопия мокроты по Цилю-Нельсону позволяет достоверно диагностировать инфекцию. Проблема вызывает точное взятие мокроты прямо из пораженного бронха. На фоне туберкулезного процесса поражается значительная часть бронхиального дерева. После бактериального посева возможно проведение пробы на чувствительность возбудителя к антибиотику.

После анализа результатом диагностики фтизиатрам стало ясно, что отсутствие выделения палочки Коха не означает отсутствие инфицирования организма. Возбудитель может определяться после второго, третьего, четвертого взятия материала.

Современные диагностические методы (дст, Квантифероновый тест) выявляют микобактерии при активном течении заболевания. При наличии микобактерий внутри лимфатических узлов, при внелегочных формах заболевания тесты чаще всего отрицательны.

Своевременная диагностика составляет основу предотвращение серьезных осложнений и опасных последствий заболевания.

Современные методы

Заменой классической туберкулинодиагностике является диаскинтест (дст). Согласно последним постановлениям исследование должно заменить стандартную пробу Манту, которая позволила выявить много случаев заболеваемости, инфицированности среди населения.

Суть диаскинтеста, как и туберкулинодиагностики, предполагает подкожное введение белков возбудителей туберкулеза. В ответ на инъекцию вырабатывается реакция гиперчувствительности со специфическими кожными изменениями: покраснение, уплотнение, образование пузырей.

Положительный результат диаскинтеста характерен для пациентов с активным течением заболевания. При инфицировании или повышенной аллергизации исследование будет отрицательным. Отрицательный эффект дст может быть результатом сильного иммунитета, но при инфицировании человека.

При сравнении с Манту диаскинтест является более универсальным и чувствительным способом диагностики туберкулеза. Отсутствие выявления инфицированности требует его применения одновременно с туберкулинодиагностикой.

Несмотря на результаты клинических испытаний дст, ученые утверждают об общей универсальности и чувствительности способа, нельзя считать исследование универсальным диагностическим решением.

Разработан тест академиками НИИ Сеченова. Отсутствие аллергии при использовании диаскинтеста объясняется подкожным введением видоспецифичных туберкулезных белков. После их введения определяется кожная реакция в виде покраснения, уплотнений.

Что такое квантифероновый тест

Квантифероновый тест оценивается после взятия крови больного. Механизм действия процедуры заключается в определении гамма-интерферона, который высвобождается Т-лимфоцитами после встречи с микобактериями туберкулеза.

Тесты определяют туберкулезные белки, которые содержат не только бактерии человечьего и бычьего типов. Квантифероновый тест можно использовать также для диагностики микобактериозов, провоцируемых другими микобактериями, которые формируют специфические изменения на рентгенограмме.

Результат теста определяется в нескольких пробирках, что повышает диагностическую чувствительность метода.

Пцр для диагностики детского туберкулеза

Полимеразная цепная реакция – точный, но дорогостоящий метод диагностики туберкулеза. ПЦР проводится после бронхоскопии.

Рационально проведение полимеразной цепной реакции после получения отрицательных результатов. Результаты оцениваются после трехкратного посева мокроты на микобактерии туберкулеза. При самых благоприятных условиях выявление возбудителя свидетельствует об инфицированности. Назначение химиопрофилактики позволяет избежать активного туберкулезного процесса при наличии палочки Коха.

При получении штамма микроорганизма возможен посев на антибиотикочувствительность. Определение антибиотиков, способных уничтожать микроорганизмы, позволяет оценить, какими препаратами проводить лечение инфекции.

ПЦР у детей проводится при отрицательных результатах посева, но при наличии виража туберкулиновой пробы, визуализации рентгенологических признаков инфицирования, выявлении клинических симптомов текущей инфекции.

Полимеразная цепная реакция обеспечивает высокую точность (около 99%). Метод основан на амплификации нуклеиновых кислот. У микобактерий, вирусов и других микроорганизмов существуют уникальные последовательности нуклеотидов. Их диагностика позволяет выявить возбудителя заболевания.

Чувствительность пцр у детей менее низка, чем у взрослых. На практике выявлены следующие особенности полимеразной цепной реакции у ребенка:

  1. Специфичность – 80-100%;
  2. Чувствительность – 25-80%.

Несмотря на высокую достоверность метода, получение отрицательного результата не означает отсутствие туберкулеза у детей. Более рационально использование способа у пациентов с иммунодефицитными состояниями. При диагностике внелегочных форм туберкулезной инфекции.

Ошибки при интерпретации определяется нарушениями при заборе и подготовке материала для исследования.

Причины отрицательного результата пцр при диагностике туберкулеза

Распространение микобактерий по организму лимфогенным (по лимфатическим сосудам) и гематогенным (по кровеносному руслу) путем обеспечивает заселение многих тканей, появление внелегочных очагов инфекции.

При рентгенологическом определении очагов распада (деструкции) в легких нет необходимости проведения пцр. У взрослых с использованием рентгенографии можно выявить запущенные формы с высокой степенью достоверности.

У детей пцр исследование применяется чаще вследствие скрытой локализации микобактерий внутри лимфоузлов, что приводит к получению отрицательных результатов при применении других способов диагностики. При бактериальном посеве достаточно выявления около 10 микроорганизмов. Нужно учитывать, что не все отвечают за активный туберкулез легких.

Для правильной диагностики пцр, бактериального посева, дст следует соблюдать требования:

  1. Хранить материал в стерильных пробирках;
  2. Исключать попадание других бактерий;
  3. При транспортировке соблюдать личную гигиену для предотвращения попадания биоматериала на тело, лицо, в дыхательные пути.

Храниться кровь вместе с консервантом ЭДТА. Существуют уникальные особенности приготовления материала для каждого лабораторного анализа, с которыми знакомы специалисты.

Инновационные методы диагностики

Раннее определение инфекции позволяет провести своевременную химиопрофилактику, предотвратить тяжелое течение заболевания.

Советуем прочитать:  Признаки, стадии и формы туберкулеза

Стертость клиники в детском возрасте, недостаточные результаты анализов, неграмотная интерпретация при оценке проб не позволяет своевременно верифицировать инфекцию. Для предотвращения детской заболеваемости требуется тщательный анализ результатов с возможностью установки диагноза на раннем этапе.

Современный способ лабораторной диагностики туберкулеза у детей – выявление TAB-TM

Реакция на определение Т-клеточного маркера у детей под названием «TAB-TM» характеризуется высокой чувствительностью. Суть метода заключается в выявлении особого кластера дифференцировки (CD-27), локализованного на поверхности Т-лимфоцитов. После выделения этого фактора проводится окрашивание цитокинов с цитометрией.

Метод в литературе стал описываться с 2014 года. Результаты наблюдений свидетельствуют о высокой чувствительности метода. Определение TAB-TM является экспресс методом диагностики туберкулеза путем исследования мокроты.

Анализ крови на туберкулез – что показывает

На начальном этапе туберкулезная инфекция протекает без специфической клинической симптоматики. Лабораторная диагностика у детей становится возможной тогда, когда палочка Коха размножается.

Какие клетки оцениваются при туберкулезном процессе в лабораторном анализе крови:

  1. Эритроциты – красные клетки крови, отвечающие за перенос кислорода к тканям. При легком течении легочного туберкулеза со стороны красного ростка крови патологических изменений не прослеживается. Наличие деструктивного очага способствует кровотечению с анемией крови. Состояние развивается при туберкулезном воспалении стенки кишечника. Количество ретикулоцитов на фоне патологии увеличивается больше 1%;
  2. Лейкоциты увеличиваются при любой инфекции. Лейкоцитоз сопровождается сдвигом лейкограммы влево. Повышение числа сегментоядерных нейтрофилов прослеживается на начальной стадии. При тяжелом туберкулезе с гнойным расплавлением, иммунодефицитных состояниях наблюдается лейкопения (снижение числа лейкоцитов крови). Одновременно повышается содержание лимфоцитов (свыше 20%);
  3. Эозинофилия может прослеживаться на начальной стадии. Состояние возникает при туберкулезных инфильтратах разных органов. Тяжелое течение туберкулеза с распадом у взрослых приводит к полному отсутствию эозинофилов;
  4. Повышение базофилов.

Лабораторный анализ на туберкулез не является специфичным ни для детей, ни для взрослых. Подобные изменения характерны для многих бактериальных или вирусных инфекций.

Показатели гемограммы предоставляют интерес для фтизиатров для определения стадии туберкулезного инфицирования.

При активной инфильтрации прослеживается лейкоцитоз вследствие увеличения количества нейтрофилов. В клетках появляется патологическая зернистость, что свидетельствует об интоксикации крови.

Очаги распада приводят к уменьшению числа эозинофилов, нейтрофилов, молодых форм, лимфоцитов. При диссеминации возникает абсолютный моноцитоз. На фоне рассасывания увеличивается число лимфоцитов и эозинофилов.

При уплотнении очагов гемограмма не характеризуется изменениями.

Анализы у детей на туберкулез: туберкулинодиагностика

Длительное время фтизиатры ставили реакцию Манту. Такие анализы на туберкулез позволяли выявлять не только активную инфекцию, но и инфицирование.

Суть пробы заключалась в подкожном введении туберкулина – вещества, которое обуславливало аллергизацию организма. Для теста применялся материал, получаемый из Micobacterium Bovis.

После подкожной инъекции получается папула, которая отражает реакцию организма на проникновения микобактерии:

  1. Нормальная папула – размер от 5 до 16 мм;
  2. При отсутствии реакции – ослабление иммунитета, отсутствие микобактерии;
  3. Большая папула – наличие антигенов бактерии, контактирование с носителем туберкулезной палочки.

Советуем прочитать:  Признаки, стадии и формы туберкулеза

Метод не считается надежным из-за большого количества ложноположительных реакций. При сомнительных результатах требовалось подтверждение пцр. С появлением диаскинтеста (дст) ситуация изменилась. Сочетанное использование способов позволяет получить более достоверные результаты.

Классические «фтизиатрические» способы диагностики туберкулеза

Фтизиатры для диагностики туберкулеза у детей и взрослых используют следующие анализы:

  • Изучение анамнеза пациента (контакт с больным или носителем туберкулезной палочки). Определение социальных факторов риска помогает предположить возможное инфицирование;
  • Оценка туберкулиновой чувствительности (проба Манту) с PPD туберкулином в дозе 5-10 ТE. Оценка результата проводится через 48-72 часа;
  • Рентгенологическое исследование проводится у детей и взрослых при подозрении на туберкулез, вираже туберкулиновых проб;
  • Бактериологический посев является неопровержимым доказательством инфекции, спровоцированной микобактерий туберкулеза. При правильном сборе мокроты, обнаружении возбудителя в промывных водах желудка анализы на туберкулез можно считать положительными. Палочка Коха обнаруживается в гнойных абсцессах, лимфатических узлах, асцитическом выпоте, плевральном экссудате, моче, цереброспинальной жидкости;
  • Скорость оседания эритроцитов увеличивается при любой инфекции, в том числе туберкулезе;
  • ПЦР позволяет выявить специфического возбудителя, но исследование дорогостоящее;
  • Диаскинтест определяет легочный туберкулез, но часто дает отрицательные результаты при внелегочной локализации инфекции.

Современная диагностика туберкулеза при применении комплекса методов позволяет с высокой степенью достоверности определить микобактерию в организме. С помощью существующих способов выявляется активный процесс или инфицирование. Нужно лишь вовремя обратиться к специалистам!

Источник: http://vnormu.ru/diagnostika-tuberkuleza-pcr-detei-vzroslyh.html

Методы выявления туберкулеза

Современные методы диагностики туберкулеза
План статьи: 1. Симптомы 2. Методики раннего выявления 3.

Методы диагностики

Туберкулёз – одно из самых часто встречающихся заболеваний человечества, которое очень легко передаётся, трудно лечиться и оставляет много негативных последствий для здоровья.

Подхватить этот недуг очень легко, а вылечить – довольно трудно, поэтому необходимо знать какие бывают методы ранней диагностики и клинические проявления туберкулёза, чтобы иметь возможность периодически проверять своё здоровье и вовремя заметить развитие заболевания.

Симптомы

Туберкулёз относится к крайне коварным и опасным недугам, так как способен развиваться и поражать лёгкие человека практически бессимптомно.

Чаще всего человек замечает, что болен, только после того, как недуг вступит в острую фазу или нанесёт непоправимый ущерб лёгочной ткани.

На ранних стадиях большая часть случаев заражения выявляется при профилактическом обследовании, однако, после опроса фтизиатра, все больные отмечают, что ощущали следующие проявления, не предавая им особого значения:

  1. Постепенно развивающийся упадок сил и апатия.
  2. Хроническая усталость.
  3. Общее недомогание или снижение самочувствия.
  4. Бледность.
  5. Потливость.
  6. Возможна одышка или сухой кашель, когда заболевание начнёт наносить ущерб тканям дыхательных путей.
  7. У детей довольно часто наблюдается замедление роста, потеря веса или даже отставание в умственном или физическом развитии.

Все эти симптомы довольно легко списать на переутомление, плохое питание, стрессы или результат вредных привычек, поэтому мало кто, вообще, обращает внимание на подобные проявления, не говоря уж о сопоставлении с таким серьёзным инфекционным недугом.

Хотя у мужчин первые признаки туберкулёза проявляются весьма ярко и могут проходить с повышением температуры вплоть до постельного режима, поэтому у мужского населения туберкулёз на ранней стадии выявляется чаще, чем у женщин, у которых он развивается крайне медленно и очень скрыто.

Методики раннего выявления

Методы ранней диагностики туберкулёза известны всем с детства, так как обязательная поголовная профилактическая диагностика проводится уже не один десяток лет, в результате чего удалось в разы сократить количество больных и победить пандемию, хотя говорить о полной ликвидации эпидемии туберкулёза в мире ещё рано. Современные методы диагностики туберкулёза на ранних стадиях представлены всё теми же туберкулиновыми пробами, правда, к пробе Манту, совсем недавно добавился диаскинтест, который не выдаёт ложноположительных результатов, потому что вместо туберкулина содержит антитела к активной форме патогенных бацилл.

Людям, которым противопоказано применение туберкулина проводится диагностика по крови следующими способами:

  1. Путём проведения иммуноферментного анализа (ИФА), во время которого проводится поиск характерных антител к бациллам возбудителя.
  2. При помощи полимеразной цепной реакции, представляющей собой генетический анализ крови на наличие в ней остатков ДНК микобактерий.
  3. Интерфероновым тестом – представляющим собой аналог Манту, только не на теле человека, а в пробирке с кровью, в которую вводится туберкулин либо живые МБТ и анализируется выработка антител лимфоцитами.
  4. Квантифероновым тестом – самым точным из всех, который проводится по аналогии с интерфероновым, но при этом вместо антител к микобактериям выявляются антитела именно к патогенным МБТ, провоцирующим развитие туберкулёза.

Также существуют и другие методы диагностики туберкулёза, определяющие его на более поздних сроках после заражения или использующиеся для подтверждения предварительного диагноза или контроля за протеканием недуга.

Методы диагностики

Несмотря на развитие науки и техники, ведущий метод выявления туберкулёза органов дыхания у взрослых по-прежнему — простая флюорография, что обусловлено не эффективностью метода, а доступностью для массового проведения.

Выявить туберкулёз при помощи рентгенологического исследования можно только тогда, когда он достаточно закрепился в организме, чтобы начать поражать ткани лёгких, а вот контролировать с его помощью развитие или отступление недуга вполне реально и удобно.

То же самое касается и компьютерной томографии, которая слишком дорогая для массового применения, но позволяет получить информацию не только о месторасположении и размерах очагов, но и их структуре в мельчайших подробностях.

Также применяются лабораторные методы выявления туберкулёза с посевом различных образцов тканей или жидкостей пациента для окончательной постановки диагноза или контроля эффективности терапии:

  • окрашивание по Цилю-Нельсену;
  • метод Левинштейна-Йенсена;
  • аппаратная диагностика ВАСТЕС;
  • исследование при помощи аппарата GeneXpert MTB/RIF.

Окрашивание по Цилю-Нельсену один из старых, но проверенных и эффективных способов выявления наличия МБТ в образце больного. Его принцип действия основан на устойчивости микобактерий к практически любым воздействиям и особенно к кислоте, а процесс проведения довольно прост:

  1. После посева образец окрашивается под термическим воздействием.
  2. Затем обесцвечивается кислотой.
  3. Вновь окрашивается в другой цвет без нагревания.

В результате таких нехитрых манипуляций бациллы остаются первоначального оттенка, а здоровые клетки напитываются вторым пигментом. Таким образом, МБТ резко выделяются на общем фоне, а их наличие в случае заражения после посева можно определить по оттенку образца.

Метод Левинштейна-Йенсена также старый способ посева на твёрдую среду с определением результата по внешнему виду колоний, размножившихся в благоприятной для туберкулёза среде. Оба эти метода эффективны и надёжны, однако, занимают очень много времени, так как обычный посев может занять около двух месяцев и более.

Для сокращения срока диагностики применяется аппарат ВАСТЕС, который производит посев максимум за 2 недели и автоматически определяет результат благодаря встроенным датчикам.

Ещё более современный метод диагностики туберкулёза — GeneXpert MTB/RIF, представляющий собой посев и определение результата при помощи специального аппарата с дополнительной автоматической проверкой возбудителя на устойчивость к лекарствам для правильного назначения терапии.

Несмотря на то, что в обязательном порядке проверка на туберкулёз проводится при помощи туберкулиновых проб или флюорографии, по желанию, любой человек может пройти обследование любым известным и доступным ему методом диагностики туберкулёза, который он посчитает более эффективным и приемлемым для себя.

Для этого достаточно высказать своё пожелание фтизиатру.

Особенно важно проходить полное профилактическое обследование женщинам, планирующим беременность, так как возбудитель легко передаётся от матери к ребёнку и может вызвать у него туберкулёз, даже если у мамы инфекция находилась только в латентной форме и в спящем виде.

Источник: http://vlegkih.ru/tuberkulez/metody-diagnostiki-tuberkuleza.html

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.